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高效液相色谱HPLC的日常维护方法

编辑:金沙官网        发布日期:2018-05-20        点击量:811

高效液相色谱(HPLC)是色谱法的一种,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。

作为实验室最常见的精密仪器之一,其使用频率较高,容易出现各种故障,因此,整理了HPLC使用过程中常见的日常维护和保养方法。

高效液相色谱HPLC的日常维护方法

一、流动相及样品的制备要求

1.高效液相级色谱醇,二次蒸馏水,缓冲盐一定要过滤,且流动相需要定期更换。

2.流动相脱气至关重要(可采用抽滤,超声波脱气等方法);

3.样品溶解后,用0.22微米的有机系膜或者水系膜过滤。


二、高压恒流泵的维护和保养

1.高压恒流泵为整个色谱系统提供稳定均衡的流动相流速,保证系统的稳定运行和系统的重现性。高压输液泵由步进电机和柱塞等组成,高压力长时间的运行回逐渐磨损泵的内部结构。在升高流速的时候应梯度升高,最好每次升高0.2mL/min,当压力稳定时再升高,如此反复直到升高到所需流速。

2.特殊情况下可拆下滤头抽取以判断其中是否堵塞;亦可用注射器汲取流动相通过吸滤头打出以判断其是否堵塞。若有堵塞情况可用异丙醇或甲醇超声波清洗;清洗不成功则需要更换。

3.在仪器使用完了以后,要及时清洗管路并冲洗泵,保证泵的良好运转环境,保证泵的正常使用寿命。


三、色谱柱的维护和保养

1.所使用的流动相均应为HPLC级或相当于该级别的,在配置过程中所有非HPLC级的试剂或溶液均经0.22um薄膜过滤,而且流动相使用前都经过超声仪超声脱气后才使用。

2.所使用的水必须是经过蒸馏纯化后再经过0.22um水膜过滤后使用,所有试液均现用现配。并且在进样的样品都必须经过0.22um薄膜针筒过滤后进样。

3.所使用到的最大流速为1.0mL/min,所以流速提升过程应是梯度提升,不存在流速的突升突降。

4.仪器检测完,需要用流动相梯度洗脱色谱柱1小时以上。


四、工作站的维护

出现死机可重启计算机;不正常运行时,首先可更换电脑测试其硬件故障;或在本机上重新插拔接口、重新安装App。

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